Der Ottonenlauf ist ein Naturerlebnis. Er führt von den 3 Harzorten Stiege, Alexisbad und Meisdorf überwiegend über Wald- und Forstwirtschaftswege, mit z. T. urigem Charakter, durch das Selketal im Harz zum gemeinsamen Ziel in die UNESCO-Weltkulturerbestadt Quedlinburg. Der Straßenanteil auf der langen Distantanz beträgt knapp 10 km. Die Läufer/innen durchqueren oder tangieren zwischen Stiege und Quedlinburg 13 Ortschaften bzw. Siedlungen, so unter anderem Güntersberge, Straßberg, Silberhütte, Alexisbad, Mägdesprung, Meisdorf, Ballenstedt, Gernrode und Bad Suderode. Es geht teilweise entlang der Selketalbahn, vorbei an 11 Harzteichen, 2 Burgen, Felsklippen mit herrlicher Aussicht auf das Tal, sowie durch 2 Felstunnel. Eigens zur Entspannung für müde Wanderer und Läufer wurde von freundlichen Zeitgenossen nach etwa der Hälfte der Strecke eine stabile Schaukel angebracht. Zahlreich kleine und mittlere Steigungen sind zu bewältigen. Der größte Teil der Strecke ist dicht bewaldet und sehr schattig.